體(ti)外培養細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)增(zeng)殖活力受多種(zhong)因素的(de)(de)影響，如某些細(xi)胞(bao)(bao)因子可(ke)(ke)促進(jin)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)增(zeng)殖，而一(yi)些藥物(wu)如抗癌藥物(wu)則可(ke)(ke)抑制細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)生(sheng)長，甚至誘(you)導細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)死亡。目前，細(xi)胞(bao)(bao)活力檢(jian)測(ce)方法中，CCK8法是一(yi)種(zhong)方便、靈敏、快速、無放射性、重復性好檢(jian)測(ce)方法。

此外，CCK8檢測(ce)亦可用于繪制細(xi)胞的(de)生長曲線，一定(ding)數(shu)量(liang)的(de)細(xi)胞接種后，連續(xu)測(ce)量(liang)7天的(de)吸(xi)光度，然后將(jiang)7天測(ce)量(liang)所得(de)的(de)吸(xi)光度值標(biao)于坐標(biao)紙上，再將(jiang)各(ge)點連成曲線，即可得(de)生長曲線。

包裝清單：

CCK8細胞增殖檢測試劑盒儲存條件：

-20℃保存(cun)，二年(nian)有效；4℃保存(cun)，一年(nian)有效

操作說(shuo)明：

1、細(xi)胞活(huo)性檢測

① 在96孔板中(zhong)接種適量的細胞懸液(ye)（100ul/孔），在培養箱中(zhong)培養24小時；

② 向(xiang)每孔中加(jia)入(ru)10ul CCK-8溶液；

③ 繼續放(fang)于培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)1-4小時；

④ 用酶(mei)標儀測定在450nm的吸光度(du)。

2、細胞(bao)增殖-毒性(xing)檢測

① 在96孔板中接種(zhong)適(shi)量的細胞(bao)懸(xuan)液（100ul/孔），在培(pei)養箱中培(pei)養24小時；

② 在96孔板(ban)中(zhong)加入不同濃度的生長因子、細胞因子或(huo)藥物等；

③ 將96孔板(ban)置(zhi)于培養(yang)箱中培養(yang)適當的時間(jian)；

④ 向每孔中加入10ul CCK-8溶液；

⑤ 繼續放于培養(yang)箱中培養(yang)1-4小時；

⑥ 用酶標儀測定在450nm的吸光(guang)度(du)。

注意(yi)事項

1、向96孔(kong)板(ban)接種細胞(bao)時，應前后、左右(you)搖(yao)晃(huang)培養板(ban)，使細胞(bao)在孔(kong)中分(fen)布均勻，避免(mian)細胞(bao)堆(dui)集在孔(kong)的中央生(sheng)長。

2、CCK-8 的培養時(shi)間(jian)(jian)一般為(wei)(wei) 1-4 小時(shi)，但在培養 30 分鐘左(zuo)右即可取(qu)出(chu)肉(rou)眼觀察顯(xian)色(se)程度，根據細胞種類而定(ding)，需要摸(mo)索條(tiao)件，CCK-8 的最佳反(fan)應時(shi)間(jian)(jian)以具體(ti)顯(xian)色(se)的最佳時(shi)間(jian)(jian)為(wei)(wei)準。

3、加入CCK8溶液時避(bi)免氣泡的(de)產生，從而(er)影響吸光(guang)度。

酶標儀(yi)讀取(qu)吸光度時可使用430-490nm之間的濾光片(pian)，但450nm 濾光片(pian)的檢測(ce)靈(ling)敏度最高。

4、CCK8的(de)檢(jian)測依(yi)賴于(yu)脫氫酶催化的(de)反應，所以(yi)(yi)還原(yuan)劑(ji)（例如一些抗(kang)氧化劑(ji)）會干擾檢(jian)測，如干預因素具有還原(yuan)性(xing)，應在檢(jian)測前通過換液的(de)方法予以(yi)(yi)去(qu)除。

5、培(pei)養(yang)基中酚紅對吸(xi)光度(du)的影響(xiang)，可(ke)以通過扣除(chu)空(kong)白(bai)孔(kong)中本底(di)的吸(xi)光度(du)而消除(chu)，因此(ci)，不會對檢測(ce)結果造(zao)成影響(xiang)。

6、所測吸(xi)光(guang)度(du)值范(fan)(fan)圍應在0.4-2之間，此范(fan)(fan)圍內的(de)吸(xi)光(guang)度(du)值與(yu)細胞的(de)數(shu)量(liang)與(yu)活力之間的(de)線性關系較為(wei)明顯，如果超出(chu)此范(fan)(fan)圍，應相應增(zeng)加或減少接種(zhong)細胞的(de)數(shu)量(liang)。

備注：

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本產品僅供科研使用。請(qing)勿(wu)用于醫藥(yao)、臨床診斷或治療，食品及化妝品等(deng)用途。請(qing)勿(wu)存放于普通住(zhu)宅(zhai)區(qu)。

為了您(nin)的安全和健康，請在實(shi)驗過程中做好防護工作。