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β-gal 報告基因染色試劑盒

更新(xin)日期:2023-12-14

訪問量:1852

廠商性質:生產廠家

所在城市:上海市

簡要描述:
大腸桿菌中的LacZ基因編碼產物為β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal),β-gal較穩定,能抵抗蛋白酶的水解,并可催化其底物X-gal產生藍色產物,所以可以方便地檢測出LacZ基因的表達。因而,LacZ基因或β-gal常用來作為報告基因,檢測表達載體介導的基因轉移表達效率,此外,也常用于基因啟動子活性的研究。
品牌其他品牌供貨周期現貨
應用領域醫療衛生,生物產業

 

我公司(si)的(de)(de)β-半乳糖苷酶(β-gal)報告(gao)基(ji)因染色試(shi)劑(ji)盒利用(yong)X-gal作為(wei)底物,配(pei)合試(shi)劑(ji)盒內提供的(de)(de)其他試(shi)劑(ji),可(ke)對固定(ding)后的(de)(de)細胞(bao)、組織冰凍(dong)切片(pian)中的(de)(de)β-gal進(jin)行顯(xian)色,陽性結果表現(xian)為(wei)藍色。

包裝清單:

產品(pin)編號產品(pin)名稱規格
SJ1233

β-半乳糖苷酶(β-gal)

報告基因染色試劑盒

100ML
說(shuo)明書一份

保存(cun)條(tiao)件:

-20℃保存,一(yi)年(nian)有效。其中X-Gal溶(rong)液需避光保存。

產品組成:

產(chan)品名稱編號(hao)名稱

β-半乳糖苷(gan)酶(mei)(β-gal)

報告基因(yin)染色試(shi)劑盒

SJ1233-A試劑A
SJ1233-B試劑B
SJ1233-C試(shi)劑C
SJ1233-D試劑(ji)D(X-gal)
SJ1233-E試(shi)劑E(10× PBS)

使用(yong)方法(fa):

使用(yong)前先(xian)將10 × PBS用(yong)去離子水稀釋至1× PBS。

染色工(gong)作液需(xu)現配現用(yong),配制方法如下:

名稱用量
試劑(A)25 ul
試(shi)劑(B)25 ul
試(shi)劑(C)25 ul
試劑(ji)D(X-gal)125 ul
試劑E(1× PBS)2.3 ml
總量2.5 ml

1、細胞樣品染色

1)培養的(de)貼壁細胞處理完成后(hou),用4%的(de)多聚甲醛固定10分(fen)鐘后(hou),用PBS洗三(san)次,每次5分(fen)鐘,去除(chu)多余的(de)PBS;

2)加入(ru)適量(liang)(liang)的(de)染色工作液,放入(ru)37℃溫箱(xiang)孵育1-24小時(35mm培(pei)(pei)養(yang)皿(min)(min)或6孔板(ban)一般使用1.5-2.0ml/皿(min)(min)(孔),其他規格的(de)培(pei)(pei)養(yang)皿(min)(min)或培(pei)(pei)養(yang)板(ban)可依據培(pei)(pei)養(yang)面(mian)積的(de)大小適量(liang)(liang)增加或減(jian)少染色液的(de)量(liang)(liang));

3)在顯微鏡下觀察,當染成藍色(se)的細胞顏色(se)適中時(shi),去(qu)除(chu)染色(se)液,用1× PBS洗三次。

4)加入適量1× PBS,鏡下觀(guan)察、拍照(染色后的標本可在4℃保存一周)

2、組織(zhi)冰凍切片染色

1)組織冰凍切片先用(yong)去離水洗滌3次,每(mei)次5分鐘,去除OCT膠;

2)用PBS洗滌切片3次,吸除PBS;

3)滴加染色工作液;

4)37℃孵育1-24小時,直(zhi)至切片(pian)中的(de)細胞的(de)顏色變藍。孵育過程最好在溫盒中進(jin)行,以(yi)防止(zhi)染色液蒸發。

 

5)吸除染色工(gong)作液,用PBS洗滌切片(pian)3次(ci),每次(ci)5分鐘。  

6)水性封片劑封片后,鏡下(xia)觀察(cha)。染色后的標本片在4℃可保(bao)存(cun)數天(tian)。

3、小組織塊染色

1)組(zu)織塊在4%的多聚甲醛固定(ding)(ding)液中充分固定(ding)(ding)后,用自來水沖(chong)洗盡量去除(chu)固定(ding)(ding)劑;

2)用PBS浸泡組織(zhi)塊(kuai)5-10分種;

3)將(jiang)組(zu)織塊(kuai)轉(zhuan)移至染(ran)色液(ye)中,37℃孵育1-24小(xiao)時(染(ran)色液(ye)的用量盡量大于組(zu)織塊(kuai)體積的10倍);

4)組織(zhi)塊中出現藍色(se)著色(se)后(hou),去除(chu)染色(se)液(ye),PBS洗滌三次,每次5分種。

5)對組織進行(xing)拍照,或將(jiang)組織塊進行(xing)冰凍切(qie)片后(hou)鏡下觀察(cha)。 

注意事項:

1、在石(shi)蠟(la)(la)包(bao)埋的(de)(de)過程(cheng)中β-半乳糖苷(gan)酶(mei)可能失活(huo),從而造(zao)成染色失敗,因此本試(shi)劑盒不建議(yi)(yi)用于石(shi)蠟(la)(la)切片的(de)(de)檢測。如果一(yi)定要(yao)用于石(shi)蠟(la)(la)切片的(de)(de)檢測,建議(yi)(yi)自(zi)行對(dui)實驗條(tiao)件進行一(yi)定的(de)(de)優(you)化。

2、染(ran)色(se)(se)時間較長(chang)時,請在溫盒中(zhong)進行(xing),或是增(zeng)加染(ran)色(se)(se)液(ye)的量,以防染(ran)色(se)(se)液(ye)蒸發變干。

   3、染色(se)后應(ying)及(ji)時觀察、拍照。放置過久由于藍色(se)產物的擴(kuo)散,可能會出現部(bu)分假陽性。

備注(zhu):

          產品信息可能會有優化升級,請以實際標簽信息為準。

 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區

 

 為了您的安全和健康,請在實驗過程中做好防護工作。

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